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PT-67病毒轉染小鼠細胞
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規(guī)格:T25瓶
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PT-67 病毒轉染小鼠細胞
PT-67 病毒轉染小鼠細胞是通過將 Moloney 小鼠白血病病毒(Mo-MLV)的包裝信號序列導入 NIH/3T3 小鼠胚胎成纖維細胞而獲得的細胞系,在基因傳遞、病毒載體構建等研究中具有獨特價值。
從生物學特性來看,PT-67 細胞呈貼壁生長,形態(tài)與原代 NIH/3T3 細胞相似,多為梭形或不規(guī)則多邊形,細胞間連接緊密。因其經過病毒轉染改造,具備高效包裝逆轉錄病毒載體的能力。該細胞能夠穩(wěn)定表達病毒包裝所需的 gag、pol 和 env 基因產物,可將帶有目的基因的逆轉錄病毒載體 RNA 包裝成具有感染能力的病毒顆粒。這些病毒顆??筛咝Ц腥径喾N細胞類型,實現外源基因的穩(wěn)定導入與表達,為基因功能研究和基因治療提供了有力工具。此外,PT-67 細胞具有較強的增殖能力,細胞傳代穩(wěn)定,在合適培養(yǎng)條件下可快速生長,便于大量制備病毒載體。
培養(yǎng) PT-67 細胞需要特定的條件和方法。常用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,胎牛血清能為細胞生長提供豐富的營養(yǎng)物質和生長因子;同時添加 1% 的青霉素 - 鏈霉素混合液,防止微生物污染。細胞需在 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中生長,二氧化碳可調節(jié)培養(yǎng)基的 pH 值,維持細胞適宜的生存環(huán)境。在培養(yǎng)過程中,當細胞融合度達到 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53mM EDTA 消化液進行消化傳代。傳代時要嚴格控制消化時間,避免過度消化損傷細胞。由于 PT-67 細胞對血清質量較為敏感,建議使用高質量胎牛血清,以保證細胞活性和病毒包裝效率。此外,為防止細胞污染和維持其病毒包裝能力,需定期檢測支原體,并避免與其他細胞系交叉操作。
在科研應用領域,PT-67 細胞應用廣泛。在基因工程研究中,科研人員可利用該細胞包裝攜帶目的基因的逆轉錄病毒載體,用于基因過表達、基因敲低等實驗,研究基因在細胞生理、病理過程中的功能。在病毒學研究中,PT-67 細胞可用于研究病毒包裝機制、病毒與宿主細胞的相互作用等。在基因治療領域,以 PT-67 細胞包裝的逆轉錄病毒載體可作為基因遞送工具,將治療性基因導入患者細胞,為遺傳性疾病、腫瘤等疾病的治療提供新的策略。此外,該細胞還可用于制備重組病毒疫苗,助力疫苗研發(fā)與抗病毒藥物篩選。

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